Что такое жидкостная цитология – Гинекология

Назначение

Используется для диагностики in vitro.

Метод представляет собой процесс приготовления клеточных препаратов на жидкой основе. Он призван заменить традиционный метод приготовления микропрепаратов мазков по Папаниколау, применяющихся в скрининговых исследованиях для выявления рака шейки матки.

Средой для сбора и транспортировки гинекологических образцов, тестируемых в анализах амплифицированных ДНК BD ProbeTec™ Chlamydia trachomatis (CT) QI и Neisseria gonorrhoeae (NG) QI, является жидкий консервант SurePath® Preservative Fluid. Инструкция по использованию SurePath® Preservative Fluid для подготовки образцов, используемых в этих анализах, см. на листках-вкладышах в упаковках наборов для анализа.

На какой день надо сдавать жидкостную цитологию

Это исследование рекомендуется проходить всем женщинам даже при отсутствии симптомов неблагополучия со стороны половой системы. Диагностика проводится с 21 года или через 3 года после начала половой жизни.

Периодичность прохождения жидкостной цитологии зависит от возраста пациентки:

  • До 29 лет исследование проводится раз в 3 года.
  • С 30 до 69 лет – ежегодно. В случае, если в течение 3 лет подряд в мазках не было выявлено никаких патологических процессов, в следующий раз жидкостная цитология проводится через 3 года.
  • Женщинам старше 70 лет, не имеющим жалоб на состояние половой системы, такой анализ не обязателен. Однако пациенткам, перенесшим рак или предрак шейки матки и страдающим папилломавирусной инфекцией, следует проходить такое обследование в любом возрасте вне зависимости от наличия неблагоприятных симптомов.
  • Внепланово анализ сдается при появлении обильных выделений, особенно с примесью крови и гноя, а также кровотечений, возникающих после полового контакта.

Что такое жидкостная цитология - Гинекология

Во время критических дней материал для обследования не берется. Анализ необходимо сдать не раньше 5 дня менструального цикла и не позже чем за 5 дней до начала следующего менструального кровотечения.

Метод определения жидкостная цитология технология NovaPrep®.

Исследуемый материал мазок эпителия слизистой шейки матки и цервикального канала

Доступен выезд на дом

ЖИДКОСТНАЯ ЦИТОЛОГИЯ NovaPrep® — СТАНДАРТ ПРОВЕДЕНИЯ ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ БИОМАТЕРИАЛА ИЗ ШЕЙКИ МАТКИ

РАК ШЕЙКИ МАТКИ (РШМ) является вторым по распространенности типом рака среди женского населения, от которого ежегодно умирает более 250 000 женщин во всем мире. По оценкам Всемирной организации здравоохранения, в течение 10 ближайших лет смертность от рака шейки матки возрастет еще на 25 %.* 

Процесс развития РШМ длительный.

Период от интраэпителиального поражения клеток низкой степени (LSIL — low grade squamous intraepithelial lesion), интраэпителиального поражения клеток высокой степени (HSIL-high grade squamous intraepithelial lesion) до инвазивного рака шейки может составить 10-15 лет. Это означает, что у женщин достаточно времени для проведения соответствующих профилактических мероприятий, препятствующих развитию инвазивного РШМ.

Для выявления предраковых изменений, которые при отсутствии лечения могут привести к развитию рака, проводится цитологический скрининг рака шейки матки — тестирование всех женщин, у большинства из которых симптомы не проявляются (цитологическое исследование биоматериала из шейки матки (окрашивание по Папаниколау, Рар-тест)).

Что такое жидкостная цитология - Гинекология

Жидкостная цитология — это стандартизированная технология приготовления цитологического препарата.

Сегодня она признана наиболее информативным способом получения биологического материала и рекомендована в качестве «золотого стандарта» диагностики интраэпителиальных неоплазий со слизистой цервикального канала и влагалищной части шейки матки и выдачи результата в соответствии с классификацией Bethesda.

Преимущества жидкостной цитологии

  1. Улучшенное качество материала:
    • в контейнер со стабилизирующим раствором попадает весь полученный эпителиально-клеточный материал;
    • минимизируется содержание слизи, элементов периферической крови, элементов воспаления, разрушенных клеток;
    • клетки сохраняют как морфологические, так и молекулярно-биологические свойства.
  2. Длительный срок хранения полученного биоматериала: материал хранится в специальном стабилизирующем растворе NovaCyt, который предотвращает преждевременное высыхание клеток, что позволяет сохранить образец в оптимальных условиях для дальнейшей его транспортировки в лабораторию.
  3. Быстрое приготовление препарата.
  4. Из полученного биологического материала можно приготовить несколько цитологических препаратов.
  5. Приготовление стандартизованного монослойного мазка.
  6. Стандартизированные методики окрашивания.

Таким образом, по сравнению с традиционным методом приготовления мазка со слизистой шейки матки, применение новой технологии жидкостной цитологии позволяет значительно повысить качество цитологического мазка.  

Главный недостаток цитологического исследования традиционного мазка из шейки матки — большая доля (до 20-40%) ложноотрицательных заключений. Ошибки цитологического метода более чем в 60% вызваны нарушениями процедур взятия и подготовки материала для исследования.

Основными причинами неадекватности цитологического препарата, приготовленного традиционным способом, являются недостаточное количество эпителиально-клеточного материала в мазке, неравномерное распределение биологического материала на стекле, большое содержание слизи, элементов воспаления, элементов периферической крови, высокая частота артефактов по причине высыхания препарата после взятия мазка (невыполнение правил влажной фиксации), неполное прокрашивание клеточного материала из-за с его многослойности (толстый мазок).

Использование технологии жидкостной цитологии позволяет снизить количество ложных результатов благодаря использованию стабилизирующего раствора, а также специального инструмента для взятия материала, щеточки Cervex-Brush (рис.1)

Ограничения метода жидкостной цитологии 

В тонкослойных мазках, приготовленных по методу ЖЦ, отсутствуют элементы фона, что улучшает качество препарата, с точки зрения оценки клеток, но в то же время не даёт возможности оценить клеточное окружение. Кроме того, врач-цитолог не может оценить препарат с точки зрения воспалительного процесса (наличия лейкоцитов, микрофлоры и пр.).

  • NovaPrep® 
  • ОСОБЕННОСТИ ТЕХНОЛОГИИ NovaPrep: 
  1. Новый формат контейнера для клеточного материала и автоматические процессоры для переноса клеток на слайды с разной производительностью.
  2. Контейнер NovaPrep отличает от других контейнеров (ThinPrep, ThreePath, CYTOScreen и др.) возможность работать с клеточным материалом при закрытой крышке (крышка содержит отверстие, закрытое резиновой пластиной) . Внутри контейнера имеются ребра, позволяющие легко отделить щетку комбинированной кисточки и оставить ее внутри контейнера. Кроме того, в контейнере имеется фильтр с ячейками 300 микрон, обеспечивающий отделение слизи и клеток крови и воспалительных клеток от диагностически значимых клеток. 
  3. Процессор в совокупности с контейнерами NovaPrep позволяет получить в автоматическом режиме мазки клеток диаметром 19 мм с четкой и воспроизводимой картинкой. 
  4. Преимущество процессора NovaCyt заключается в абсолютной стандартизации производимых мазков, обеспеченной технологией двойной седиментации: этапы принудительной фильтрации или центрифугирования полностью отсутствуют. В процессоре реализована процедура фильтрации, концентрирования и разведения клеток, полностью сберегающая морфологию и объем клеток.
  5. Процессор имеет дополнительное оборудование для получения материала для последующего анализа содержимого контейнеров на вирус папилломы человека, ПЦР анализ и многое другое.
  6. Используются запатентованные расходные материалы: контейнер для тестирования и система осаждения для автоматизации и стандартизации слайдов для жидкостной цитологии.
  7. Технология NovaPrep предназначена для получения мазков как для гинекологической, так и негинекологической жидкостной цитологии.

Краткий обзор и описание

Скрининговое исследование для выявления рака шейки матки с использованием метода Папаниколау (Pap) включает микроскопическое исследование экто- и эндоцервикальных клеточных образцов, нанесённых на предметные стёкла и окрашенных по методу Папаниколау. Цервикальное цитологическое скрининговое исследование с помощью мазка по Папаниколау позволило сократить уровень смертности от инвазивной карциномы шейки матки на 50-70%.

Для точности диагноза по мазкам Папаниколау крайне важно соблюдать процедуры отбора и приготовления образцов. Для полной точности чрезвычайно важна рандомизация и равномерный отбор части образца. Традиционная процедура взятия мазка по Папаниколау не предусматривает перемешивания образца перед приготовлением микропрепарата.

Поскольку клетки на устройстве для взятия проб погружены в слизь, те клетки, которые переносят на микропрепарат, могут не быть репрезентативной выборкой всех клеток взятого мазка. Клетки переносятся на предметное стекло в зависимости от того, в каком месте устройства для взятия проб они находились.

Неоднородность типичного образца цервикального мазка ведёт к тому, что мазки, приготовленные традиционным способом, трудно готовить, исследовать и интерпретировать. Часто большие области микропрепаратов, приготовленных традиционным способом, покрыты примесями, клетками воспаления и пластинами эпителиальных клеток, которые могут скрывать ценный диагностический материал.

Описываемый метод представляет собой метод для превращения жидкой суспензии взятого мазка цервикальных клеток в равномерно окрашенный гомогенный микропрепарат SurePath® без разрушения скоплений клеток, необходимых для диагностики. Процесс включает консервацию клеток, их рандомизацию, обогащение диагностического материала, пипетирование и осаждение для создания клеточного препарата.

Принципы методики

Метод жидкостной цитологии представляет собой процесс приготовления клеточных препаратов цервикальных клеток на жидкой основе.

Гинекологические образцы собираются квалифицированным медицинским персоналом с помощью приспособления типа «метёлка» (например, Cervex Brush®) или эндоцервикального комбинированного устройства типа щёточки-шпателя (например, Cytobrush® Plus GT или Pap Perfect® компании MedScand (USA) Inc.) со съёмными головками.

Cytobrush Plus

Щёточка-шпатель Cytobrush Plus.

В лаборатории законсервированный образец перемешивают путём встряхивания, а затем переносят в пробирку с PrepStain® Density Reagent (плотным реагентом). Стадия обогащения, состоящая из осаждения препарата на центрифуге через плотный реагент, частично удаляет из препарата ненужные для диагностики примеси и избыточные клетки воспаления.

После центрифугирования пробирку с обогащённым клеточным компонентом восстанавливают деионизированной водой, и клеточный материал ресуспендируют с помощью пипеточного дозатора путём последовательного отбора и выпуска жидкости. Затем материал образца переносится в PrepStain® Settling Chamber (осадочную камеру), помещённую на предметное стекло SurePath® PreCoat.

Клетки осаждаются под действием силы тяжести в течение короткого периода инкубации. Избыточный материал сливают. Микропрепарат SurePath® PreCoat окрашивают, осветляют и накрывают покровным стеклом. Клетки располагаются в круге диаметром 13 мм. Микропрепарат изучается под микроскопом квалифицированным цитотехнологом или патологом, с учётом другой информации о пациенте.

Предметные стёкла PreCoat

Предметные стёкла PreCoat (SurePath® PreCoat Slides).

Ограничения

  • Гинекологические образцы для приготовления препаратов, получаемых с помощью ручного метода, должны собираться с помощью одобренного устройства типа «метёлка» в соответствии со стандартной процедурой взятия мазка, определённой производителем.
  • Приготовлением и исследованием препаратов TriPath Imaging®, Inc. на жидкой основе могут заниматься только лица, прошедшие обучение в компании TriPath  или иных организациях, уполномоченных компанией TriPath  на проведение подобного обучения.
  • Для обеспечения требуемой эффективности устройства следует использовать только материалы, поставляемые или рекомендуемые компанией TriPath Imaging®, Inc. Использованные материалы должны быть надлежащим образом утилизированы в соответствии с нормативами организации и действующим законодательством.
  • Все материалы предназначены для одноразового использования и не могут быть использованы повторно.
  • Для выполнения цитологического исследования SurePath® на жидкостной основе требуется 8,0±0,5 мл образца, собранного в SurePath® Preservative Fluid Collection Vial (флакон для забора мазка с жидким консервантом).

Как берется образец на жидкостную цитологию

Материалом для проведения анализа служат образцы слизистой, взятые с шейки. Для их забора используется специальная щеточка, конструкция которой позволяет захватить образцы слизистой с наружной поверхности шейки (эктоцервикса) и из цервикального канала (эндоцервикса).

Брать клетки слизистой для проведения жидкостной цитологии не больно. Иногда после процедуры  могут наблюдаться незначительные кровянистые выделения, продолжающиеся несколько часов и самостоятельно проходящие.

Жидкостная цитология отличается от обычной методом приготовления препарата:

  • При традиционном анализевзятый мазок переносится на сухое стекло, а затем высушивается. Окраска образца проводится вручную. Поэтому мазок часто окрашивается неравномерно, а результат может исказиться за счет примеси крови, гноя, белковых соединений.
  • При взятии жидкостной цитологии материал помещается в контейнер со специальной консервирующей жидкостью. Приготовление препарата и его окраска при жидкостной цитологии делается автоматически в лаборатории.

После забора материала проводится клеточное обогащение образца. Содержимое контейнера перемешивают и помещают в центрифугу. При этом клетки разделяются на слои. Элементы крови, белок, разрушенные клеточные структуры остаются вверху, и их можно легко слить. Внизу остаётся чистый образец, идеально подходящий для анализа.

Нижний клеточный слой переносится на предметное стекло и окрашивается. Специальный аппарат, с помощью которого делают жидкостную цитологию, проводит контроль качества образцов, отсеивая неправильно приготовленные, неинформативные и не подходящие для диагностики.

После этого окрашенные мазки прогоняют через анализатор – прибор, который отмечает подозрительные стекла, требующие пересмотра специалистом-цитологом. Сочетание двух видов контроля – аппаратного и врачебного – позволяет максимально увеличить точность исследования.

Предупреждения

  • Жидкий консервант SurePath® Preservative Fluid содержит водный раствор денатурированного этилового спирта и не предназначен для употребления внутрь. Смесь содержит небольшие доли метилового и изопропилового спиртов, которые при приёме внутрь могут быть опасны для здоровья и привести к слепоте.
  • Плотный реагент PrepStain® Density Reagent содержит азид натрия. Азид натрия может реагировать с медными и свинцовыми трубами, образуя высоковзрывчатые азиды металлов. При утилизации смойте большим количеством воды, чтобы предотвратить накопление азида.

Преимущества жидкостной цитологии

  • Возможность получения высококачественного биоматериала. Для транспортировки и хранения образцов используются специальные контейнеры, а система обогащения способствует тщательной очистке клеток слизистой от примесей.
  • Максимальная сохранность материала – жидкостная цитология позволяет наиболее полно сохранить молекулярно-биологические свойства образцов.
  • Низкая вероятность ошибки – в контейнер с раствором попадает весь эпителиально-клеточный материал. Поэтому врач не пропустит раковые или предраковые клетки, даже если они находятся в небольшом количестве.
  • Минимальное число ложноположительных результатов и высокая точность исследования. Методика выявляет рак шейки матки в 100% случаях, а различные степени дисплазии (предрака) – в 98% случаев.
  • Длительные сроки хранения образцов, помещенных в специальные стабилизирующие растворы.
  • Возможность быстрого получения результата, достигаемого частичной автоматизацией исследования. Жидкостная цитология делается по времени не более одного рабочего дня.

Можно выделить следующие преимущества метода жидкостной цитологии:

  1. Качество биологического материала:
    • отобранный материал попадает в емкость со стабилизатором в полном объеме;
    • материал очищается от компонентов крови, слизи, разрушенных клеток;
    • клетки сохраняют все свои исходные свойства.
  2. Нахождение нативного материала в специальном составе-стабилизаторе, позволяющее значительно увеличить срок его хранения.
  3. Подготовка многослойного мазка, стандартизированные методики окрашивания в качестве одного из этапов стандартизации преаналитического этапа исследования.

Сравнение методов

Жидкостная цитология шейки матки и ее традиционный аналог различаются по следующим характеристикам:

  • морфологические критерии;
  • классификация для ПАП-теста;
  • наличие стандартного бланка заключения;
  • наличие специалистов, имеющих соответствующую классификацию;
  • тарификация и включение в систему обязательного медицинского страхования;
  • диагностическая эффективность;
  • стоимость.

Морфологические критерии

Данная характеристика разработана и хорошо изучена лишь для традиционной цитологии. Для жидкостного цитологического исследованияморфологические критерии не выработаны.

Классификация для ПАП-теста

Имеется классификация для традиционного метода исследования. Для жидкостной цитологии классификация не разработана, однако могут использоваться элементы классификации Бетезда.

Наличие стандартного бланка заключения

Заключение при традиционной цитологии выдается на стандартном бланке. Для жидкостной цитологии такой бланк не разработан.

Наличие специалистов, имеющих соответствующую классификацию

Метод жидкостной цитологии по сравнению с традиционным способом является достаточно новым, в связи с чем может наблюдаться нехватка специалистов соответствующей квалификации.

Тарификация и включение в систему обязательного медицинского страхования

Традиционная цитология тарифицирована и включена в систему ОМС. Жидкостная цитология шейки матки пока в систему ОМС не включена, следовательно, ее проведение возможно исключительно за счет средств самой пациентки.

Диагностическая эффективность

Диагностическая эффективность традиционного цитологического исследование клеток шейки матки достигает 96%. Результат жидкостной цитологии информативен только в отношении злокачественных опухолей и диспластических изменений тканей шейки матки.

Стоимость

Цена традиционного исследования клеток шейки матки невысока, в то время как жидкостное цитологическое исследование является дорогостоящим методом, особенно в комплексе с КТ.

Метод жидкостной цитологии, в том числе в технологии BD ShurePath, сегодня активно используется в практике отечественных и зарубежных лабораторий. Он уже успел завоевать признание специалистов со всего мира, во многом благодаря высоким стандартам качества.

Результат преаналитического этапа данной методики – цитологический препарат, характеризующийся автоматизированным тонкослойным нанесением материала. Это обеспечивает высочайшее качество проведения исследования.

Высокотехнологичная методика жидкостной цитологии широко распространена именно в цитологических исследованиях гинекологического материала.

Это позволяет увеличить число полученных клеток шейки матки в 2-3 раза. Это принципиальное отличие данной технологии от традиционного цитологического исследования, при котором часть материала, находящегося на цитощетке, утилизируется.

Что такое жидкостная цитология

Консервант для жидкостной цитологии BD ShurePath является универсальным – он может применяться как для эксфолиативного, так и для аспирационного и пункционного цитологического материала.

Подготовка к жидкостной цитологии шейки матки играет очень важную роль, так как он нее в большой степени зависит точность полученного результата.

При проведении жидкостной цитологии шейки матки у женщин моложе 20 лет высока вероятность получения ложноположительного результата. Это связано, в первую очередь, с преходящими гормональными колебаниями.

Также некорректный результат может быть получен в том случае, если женщина не подготовлена к исследованию должным образом, например:

  • мазок взят в период менструации;
  • в мазке обнаруживаются половые клетки мужчины;
  • в образце присутствуют следы контрацептивных или антимикробных средств, геля для УЗИ, смазки с презерватива;
  • непосредственно перед забором материала женщине было проведено бимануальное исследование органов малого таза (в этом случае в мазке обнаружатся следы талька).

Нужно помнить, что если не были соблюдены условия забора биологического материала или сам мазок на жидкостную цитологию был приготовлен с нарушением требований, то результат также может оказаться неверным.

Рак чаще всего возникает на границе плоского и цилиндрического эпителия по периметру маточного зева, поэтому соскоб обязательно включает в себя и клетки этой зоны, и клетки цервикального канала.

Огромную роль при этом играет инструмент – он должен быть таким, чтобы гарантированно собрать эпителий со всех указанных выше участков, обеспечив тем самым информативность и точность исследования. Использование не приспособленных для данной цели инструментов не разрешается.

Особенности забора материала:

  • мазок берется не ранее пятого дня менструального цикла и не позднее, чем за пять дней до предполагаемого дня начала менструации;
  • мазок не берется в течение суток после полового акта и в течение 2-3 суток — после использования увлажняющих смазок, растворов Люголя или уксуса, спермицидных кремов и гелей, тампонов, спринцевания, введения в половые пути лекарственных препаратов в виде кремов или свечей, а также геля для УЗИ;
  • при наличии острого инфекционного процесса целесообразно получение материала для идентификации возбудителя (по истечении 2 месяцев с момента окончания лечения необходимо прохождение цитологического контроля).

Всегда нужно иметь в виду, что даже отрицательный результат метода жидкостной цитологии не исключает наличия патологических изменений в тканях, поэтому женщине очень важно проходить периодические профилактически осмотры врача-гинеколога и выполнять повторные цитологические исследования.

Формулировка заключения при жидкостной цитологии шейки матки идентична таковой при традиционном исследовании, однако его интерпретация должна проводиться с учетом обнаружения онкомаркера р16ink4a.

Это особенно касается различного рода дисплазий шейки матки.

Рисунок 1. Мазки полученные Г6 — традиционным способом, Р20 — при помощи жидкостной цитологии.

Причиной большого количества ложноположительных результатов являются дефекты взятия или переноса биоматериала для подготовки мазков.

Метод жидкостной цитологии позволяет исключить потерю большого числа клеток эпителия ШМ, что в разы повышает его информативность.

Рисунок 2. Мазки, полученные традиционным способом (а) и при помощи жидкостной цитологии (b).

Преимущество жидкостной цитологии в том, что что из одного забора биоматериала она способна дать до 6 «серийных» мазков. Это позволяет применять и дополнительные методики исследования, например, ПЦР.

Жидкостная цитология, ПЦР и некоторые другие виды исследований часто проводятся в комплексе при подозрении на дисплазию или злокачественное перерождение тканей ШМ.

Рисунок 3. Негативная реакция на р16ink4α в нормальном плоском эпителии шейки матки

Рисунок 4. Позитивная реакция на р16ink4α (коричневое окрашивание ядер) в диспластически измененном эпителии шейки матки.

Экспрессия онкомаркера р16 коррелирует с низкой, умеренной и тяжелой степенью дисплазии тканей. В плоском эпителии без признаков дисплазии экспрессия р16 отсутствует.

Отметается четкая связь наличия ДНК вируса папилломы человека с дисплазией тканей ШМ, однако встречается большое количество положительных на ВПЧ случаев, в которых при последующем цитологическом исследовании не было выявлено предраковых и раковых состояний.

Это явление подтверждалось отрицательной иммуноцитохимической реакцией на р16 в диспластических клетках.

Рисунок 5. Негативная иммуноцитохимическая реакция на р16ink4α в диспластических клетках (указано стрелкой).

  1. Расшифровка жидкостной цитологии шейки матки зависит от квалификации и опыта врача-цитолога.
  2. Дополнительному исследованию на наличие онкомаркера р16 должны быть подвергнуты все случаи атипичной цитологии, за исключением инвазивного рака, а также неопределенные цитологические заключения и изменения железистого эпителия.

Показаниями к жидкостной цитологии являются:

  • подозрение на диспластические изменения тканей ШМ;
  • подозрение на рак шейки матки.

Исследование назначается при регулярном профилактическом обследовании всех женщин старше 25 лет. Анализ у женщины более молодого возраста целесообразен в том случае, если она живет половой жизнью.

Меры предосторожности

  • Следует соблюдать указания по надлежащей лабораторной практике, а также все процедуры, рекомендованные при использовании метода жидкостной цитологии.
  • Все реагенты стабильны до истечения указанного срока годности при условии соблюдения рекомендованных условий хранения.
  • Бактериальная контаминация реагентов может привести к неправильным результатам.
  • Замена предметных стёкол SurePath® PreCoat на другие может привести к неоптимальным результатам.
  • Избегайте расплёскивания и распыления жидкостей. Используйте соответствующие средства защиты рук и глаз, а также защитную одежду.
  • Жидкий консервант SurePath® Preservative Fluid обладает бактерицидным действием и был проверен на действие против следующих микробов: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Candida albicans, Mycobacterium tuberculosis и Aspergillus niger. Однако следует постоянно соблюдать универсальные меры предосторожности по обращению с биологическими жидкостями.

Как расшифровать жидкостную цитологию

  • NILM – отсутствие предраковых и злокачественных патологий. В образце обнаруживаются только клетки многослойного эпителия, покрывающего шейку матки, и цилиндрического, находящегося в цервикальном канале. В мазке также присутствует здоровая флора половых путей. Этот результат считается нормой.
  • ASC-US – обнаружены клетки эпителия, имеющие сомнительную структуру и происхождение, возможно, потенциально злокачественные. Такой женщине назначается дополнительное обследование.
  • LSIL – слабая степень дисплазии. В этом случае диспластические процессы не проникли глубоко в слизистую. Такая картина жидкостной цитологии цервикального канала соответствует первой степени дисплазии – CIN I – и появляется при начавшемся предраковом перерождении.
  • HSIL – более тяжёлая вторая-третья степень дисплазии (CIN II, CIN III), при которой предраковые изменения уже глубоко проникли внутрь слизистой.
  • AISаденокарцинома in situ (рак на месте) – начальная стадия рака, при которой он ещё не вышел за границы слизистой оболочки и не распространился на остальные ткани.

Отбор дополнительной аликвоты

Во флаконе для забора мазка с жидким консервантом доступен объём, достаточный для отбора до 0,5 мл однородной смеси клеток и жидкости для дополнительного тестирования перед выполнением теста SurePath® Pap (теста по Папаниколау). Оставшийся после отбора объём достаточен для теста по Папаниколау.

Несмотря на отсутствие свидетельств о влиянии отбора аликвоты из флакона для забора мазка с жидким консервантом на качество образца для цитологического исследования, в редких случаях в ходе этого процесса возможно неравномерное распределение соответствующего диагностического материала. Если результаты исследования не соответствуют истории болезни пациента, медицинским работникам может потребоваться забор нового образца.

Более того, цитологическое исследование решает клинические задачи, отличные от тестирования на заболевания, передающиеся половым путём (ЗППП), таким образом, отбор аликвоты может быть неприемлемым для некоторых клинических ситуаций. При необходимости можно отобрать отдельный образец для тестирования на ЗППП вместо отбора аликвоты из флакона для забора мазка с жидким консервантом.

При отборе аликвоты из образцов с низкой насыщенностью клетками в SurePath® Preservative Fluid Collection Vial может остаться объём материала, недостаточный для выполнения теста SurePath® Pap (теста по Папаниколау).

Что такое жидкостная цитология

Аликвоту следует отбирать перед выполнением теста SurePath® Pap. Допускается отбор только одной аликвоты из флакона для забора мазка с жидким консервантом до выполнения теста по Папаниколау, независимо от объёма аликвоты.

Флакон для забора мазка с жидким консервантом

Флакон для забора мазка с жидким консервантом (SurePath® Preservative Fluid Collection Vial).

Методика

  1. Для обеспечения однородности смеси необходимо встряхивать флакон для забора мазка с жидким консервантом в течение 10-20 с. Затем в течение одной минуты следует отобрать аликвоту 0,5 мл.
  2. Наконечник пипетки для отбора аликвоты должен иметь аэрозольный барьер, а объём пипетки должен соответствовать объёму отбираемой аликвоты.
    Примечание. Не следует использовать серологические пипетки. Во избежание попадания загрязнений в SurePath® Preservative Fluid Collection Vial или в аликвоту необходимо соблюдать требования надлежащей лабораторной практики. Отбор аликвоты должен выполняться в соответствующем месте за пределами помещения, в котором выполняется амплификация.
  3. Визуально проверьте материал аликвоты в пипетке на наличие крупных твёрдых или полутвёрдых частиц. При обнаружении таких примесей в ходе забора аликвоты следует немедленно вернуть всю отобранную жидкость во флакон с образцом и отбраковать образец для дополнительного тестирования перед тестом по Папаниколау.
  4. Инструкции по обработке аликвоты в анализах амплифицированных ДНК BD ProbeTec™ CT QI и GC QI см. на листках-вкладышах в упаковках наборов для анализа, предоставленных их производителями.

Результаты и интерпретация

  • К препаратам на жидкой основе, приготовленным по методу компании TriPath Imaging®, Inc., можно применять все диагностические критерии, применяемые в настоящее время в цитологических лабораториях для традиционных мазков по Папаниколау.
  • Любые патологические или сомнительные явления, обнаруженные при скрининговом исследовании, должны быть направлены патологу для ознакомления и диагноза. Любые мофологические изменения клеток важны и должны быть отмечены.
  • Первый класс – клетки не изменены, имеют правильную форму и размеры. Такой итог жидкостной цитологии считается нормой.
  • Вторая – цитологическая картина соответствует воспалительному или инфекционному процессу. В этом случае женщине нужно сдать мазок на флору и пройти кольпоскопию – осмотр слизистой шейки матки с помощью прибора-кольпоскопа.
  • Третий класс – строение и форма клеток изменены. Их количество небольшое. Такой женщине нужно будет через некоторое время сделать повторную жидкостную цитологию шейки матки, чтобы исключить развитие предрака и рака.
  • Четвёртый класс – в мазке обнаруживается большое количество диспластических, неправильно развитых клеток. При таком результате жидкостной цитологии женщине назначается биопсия – взятие с измененных участков шейки образцов на гистологическое (клеточное) исследование, подтверждающее или исключающее раковую опухоль.
  • Пятый класс – обнаруживаются предраковые и злокачественные клетки. Такая картина соответствует различным формам рака шейки матки.

В результатах анализа также указываются данные об имеющейся патогенной микрофлоре. Это дает возможность выявить различные инфекции.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl Enter.

Необходимые материалы

  • SurePath® Preservative Fluid Collection Vial (флакон для забора мазка с жидким консервантом)
  • PrepStain® Density Reagent (плотный реагент)
  • PrepStain® Settling Chambers (осадочные камеры)
  • SurePath® PreCoat Slides (предметные стёкла PreCoat)
  • Центрифужные пробирки
  • PrepStain® Syringing Pipettes (шприц-пипетки)
  • Наконечники аспиратора
  • Центрифуга
  • Штативы для микропрепаратов
  • Модульный аспиратор (необязательно)
  • Лоток для обработки (необязательно)
  • Приспособление типа «метёлка» или эндоцервикальное комбинированное устройство типа щёточки-шпателя со съёмной головкой (головками) для взятия мазка
  • Устройство для встряхивания
  • Точные пипетки со съёмными наконечниками
  • Деионизированная вода (pH 7,5-8,5)
  • Изопропиловый спирт и химически чистый этиловый спирт
  • Реагенты для окрашивания
  • Осветляющее средство, среда для заливки и покровные стёкла

Хранение

  • Жидкий консервант SurePath® Preservative Fluid без цитологических образцов может храниться при комнатной температуре (от 15 до 30 ºС) до 36 месяцев со дня изготовления.
  • Срок хранения SurePath® Preservative Fluid с цитологическими образцами – до 6 месяцев в холодильнике (от 2 до 10 ºС) или 4 недели при комнатной температуре (от 15 до 30 ºС).
  • SurePath® Preservative Fluid, содержащий цитологический образец для использования в анализах амплифицированных ДНК BD ProbeTec™ CT QI и GC QI может храниться и транспортироваться до 30 дней при температуре от 2 до 30 ºС перед переносом в пробирки для разбавления образца с целью проведения цитологических исследований на жидкостной основе анализах амплифицированных ДНК BD ProbeTec™ QI.

Процедуры

  1. После взятия мазка с помощью Cervex-Brush® компании Rovers или аналогичного устройства для взятия мазка снимите головку устройства с ручки и поместите во флакон с жидким консервантом. Закройте флакон пробкой, прикрепите этикетку и отправьте в лабораторию.
  2. После регистрации флаконов с образцами в лаборатории поместите каждый флакон в штатив для обработки в комплекте с маркированной центрифужной пробиркой, в которую заранее помещено 4 мл плотного реагента PrepStain® Density Reagent и маркированного SurePath® PreCoat Slides (микропрепарата PreCoat). Плотный реагент следует добавить в пробирку до того, как туда будет добавлен образец, иначе качество процедуры снизится.
  3. Энергично встряхните каждый флакон с образцом в течение 10-20 секунд.
    (Во флаконе для забора мазка с жидким консервантом доступен объём, достаточный для отбора до 0,5 мл однородной смеси клеток и жидкости для дополнительного тестирования. Оставшийся после отбора объём достаточен для теста по Папаниколау. Отбор аликвоты может производиться после встряхивания в ходе теста с жидким консервантом SurePath®.)
    – Перенесите образец с помощью дополнительного автоматического устройства PrepMate™ Automated Accessory и шприц-пипеток PrepStain® Syringing Pipettes. См. инструкции в руководстве по эксплуатации устройств PrepMate.
  4. Поместите пробирки в штативы центрифуги в порядке, указанном на диаграмме последовательности расположения в руководстве по эксплуатации (каждый штатив вмешает до 12 пробирок). Последовательность размещения пробирок очень важна. Должен соблюдаться баланс.
  5. При необходимости сбалансируйте центрифужные пробирки добавлением консервирующей жидкости и центрифугируйте образцы в течение 2 минут при 200 g.
  6. При использовании модульного аспиратора включите систему Easy Aspirator и установите давление 230±50 мм рт. ст. Наденьте на аспиратор системы Easy Aspirator чистые наконечники.
  7. Извлеките штативы центрифужных пробирок из центрифуги. Медленно опустите наконечники системы Easy Aspirator (или одноразовые пипетки для переноса) в центрифужные пробирки для удаления надосадочной фракции. По завершении устройство аспирации должно касаться верха пробирки. Между образцами промывайте наконечники аспиратора водой.
  8. Центрифугируйте пробирки в течение 10 минут при 800 g, чтобы сконцентрировать диагностический компонент в клеточный осадок на дне пробирки.
  9. Извлеките штатив с пробирками из центрифуги. Осторожно и быстро слейте жидкость в раковину. Держа штатив перевёрнутым, осторожно промокните пробирки фильтровальной бумагой так, чтобы клеточный осадок остался в пробирке.
  10. Пометьте предметное стекло PreCoat номером каждого образца, стараясь не касаться поверхности стекла. Поместите предметные стёкла в штатив и установите на каждое предметное стекло осадочную камеру. Положение каждого нумерованного предметного стекла PreCoat должно соответствовать положению соответствующей центрифужной пробирки.
  11. Добавьте 4 мл буферной деионизированной воды (pH 7,5-8,0) в каждую пробирку и хорошо перемешайте встряхиванием.
  12. Обрабатывая пробирки с образцами по одной, перемешивайте их встряхиванием и немедленно перенесите 800 мкл клеточной суспензии в соответственно пронумерованную осадочную камеру на предметном стекле PreCoat. Повторите операцию для каждого образца.
  13. Подождите 10 минут, чтобы произошло полное осаждение. После осаждения осторожно переверните лотки с предметными стёклами над раковиной, чтобы слить оставшуюся жидкость, и промокните лишнюю жидкость фильтровальной бумагой.
  14. Промойте каждую осадочную камеру 500 мкл денатурированного этилового спирта слейте жидкость. Повторите промывание спиртом, слейте лишнюю жидкость и промокните фильтровальной бумагой, держа образцы перевёрнутыми не менее 1 минуты.
  15. Удалите осадочную камеру.
  16. Окрасьте микропрепараты SurePath® и закройте их покровными стёклами.
Adblock detector